749 Shares 3899 views

Reakcja łańcuchowa polimerazy oraz rodzaju i zakresu

Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR), – metody biologii molekularnej, które pozwala na wykrycie w biologicznych materiałów małych ilości kwasu dezoksyrybonukleinowego (DNA), albo raczej niektóre jej fragmenty i mnożą te wiele razy. Następnie były identyfikowane wizualnie za pomocą elektroforezy w żelu. Reakcja została opracowana w 1983 roku przez K. Mullis i zawarte w liście wybitnych odkryć ostatnich lat.


Jakie są mechanizmy PCR

Cała procedura ta oparta jest na zdolności kwasów nukleinowych do autoreplikacji, że w tym przypadku, które odbyło się sztucznie w laboratorium. Replikacja DNA nie może rozpocząć się w dowolnym obszarze cząsteczki, ale tylko w miejscach, z określoną sekwencją nukleotydów – fragmentów wyjściowych. W celu umożliwienia reakcji łańcuchowej polimerazy rozpoczęto musimy starterów (lub DNA Probes). Są to krótkie fragmenty sekwencji DNA o określonej sekwencji nukleotydowej. Są one komplementarne (to jest, co odpowiada) rozpoczęcie próbnych części DNA.

Oczywiście, aby utworzyć startery, naukowcy muszą badać sekwencję nukleotydów w kwasie nukleinowym, które są zaangażowane w proces. Te sondy DNA zapewnia swoistość reakcji i ich inicjacji. Łańcuchowa reakcja polimerazy nie udać, jeśli próbka nie znajdzie się co najmniej jedną cząsteczkę DNA pożądanego. Na ogół, reakcja ta wymaga powyższych starterów, zestaw nukleotydów, odporny polimerazy DNA ciepła. Ten ostatni jest enzym – Katalityczne reakcje syntezy nowych cząsteczek kwasu nukleinowego, na podstawie próbek. Wszystkie z tych substancji, w tym substancji biologicznych, które są potrzebne do identyfikacji DNA są połączone w mieszaninie reakcyjnej (w roztworze). Jest on umieszczony w specjalnym termostatu, który wykonuje swój bardzo szybkiego ogrzewania i chłodzenia w określonym czasie – cyklu. Są to zazwyczaj 30-50.

Jak to jest reakcja

Istotą jest to, że podczas jednego cyklu, startery są dołączone do części o pożądanej DNA, po której idzie podwojenie przez enzym. Na podstawie otrzymanych nici DNA syntetyzowanych w kolejnych cyklach coraz więcej elementów identycznych cząsteczek.

Łańcuchowa reakcja polimerazy jest stale zwrócone w wyniku jego działania. Charakteryzuje się pierwszy podwojenie ilości produktu w czasie każdego cyklu nagrzewania i chłodzenia. W drugim etapie reakcji zachodzi opóźnienie, ponieważ enzym nie jest uszkodzony i traci aktywność. Ponadto uszczuplone nukleotydów i starterów. W ostatnim etapie – w plateau – produkty nie są już gromadzić jako odczynniki skończona.

Gdzie jest on używany

Niewątpliwie najszerszy reakcja łańcuchowa polimerazy aplikacja znajdzie się w medycynie i nauce. Jest on stosowany w publicznych i prywatnych biologii, weterynarii, farmacji, a nawet ekologii. Choć te ostatnie robią do monitorowania jakości żywności i obiekty ochrony środowiska. Aktywnie wykorzystywane reakcję łańcuchową polimerazy w praktyce sądowej w celu potwierdzenia ojcostwa i identyfikacji tożsamości osoby. W kryminalistyce, jak również w paleontologii, często ta metoda jest jedynym sposobem, ponieważ jest zazwyczaj dostępny dla badania bardzo małych ilości DNA. Oczywiście, bardzo szeroko stosowaną metodą jest znaleźć w praktyce medycznej. Musiał ją w takich dziedzinach, jak genetyka, zakaźnych i chorób onkologicznych.