Testy serologiczne: rodzaje, zastosowanie

Badania laboratoryjne praktycznie wszystkich chorób zakaźnych polega na wykrywaniu przeciwciał w krwi pacjenta, które są wytwarzane przez antygen patogenu metodami serologicznymi. Weszli do praktyki medycznej w końcu XIX – początku XX wieku.

Rozwój nauki przyczyniła się do zdefiniowania struktury antygenowe mikrobów i formuł chemicznych, ich toksyn. Możliwe jest stworzenie nie tylko terapeutyczną ale także diagnostyczny surowicy. Otrzymuje się je przez podanie atenuowane patogeny zwierząt laboratoryjnych. Po kilku dniach moczenia krwi królików i myszy produktów stosowanych do identyfikacji bakterii lub ich toksyn z zastosowaniem testów serologicznych.

Zewnętrzne przejaw tej reakcji zależy od warunków jego postaci i stanu antygenów krwi pacjenta. Jeśli mikroorganizmy są nierozpuszczalne cząstki osiadają poddano lizie unieruchomiony lub związany w surowicy. Jeśli antygeny są rozpuszczalne, to pojawia się zjawisko neutralizacji lub wytrącanie.

aglutynacji (PA)

Serologiczny test aglutynacji jest bardzo specyficzny. Jest to łatwe do wykonania i jest dość jasne, aby szybko wykryć obecność antygenów w surowicy pacjenta. jest stosowany do ustawiania reakcji Vidal (diagnozy duru paratyfus) i Weiglu (tyfus).

Jest ona oparta na specyficznej interakcji między ludzkich przeciwciał (i) i aglutyniny komórek bakteryjnych (agglyutenogenami). Po ich interakcji powstają cząstki osadu. Jest to pozytywny znak. Do ustawiania reakcji mogą być stosowane środki żywe lub martwe mikroorganizmów, grzyby, pierwotniaki, komórek krwi, oraz komórki somatyczne.

Reakcje chemiczne dzieli się na dwa etapy:

1. Specyficzne przeciwciała związek (AT) z antygenami (AG).
2. Niespecyficzne – osadzanie konglomeratów AG-AT, czyli tworzenia się aglutynacji.

Reakcja aglutynacji pośredniej (TPHA)

Reakcja ta jest bardziej wrażliwa niż poprzedni. Jest on stosowany w diagnostyce chorób wywołanych przez bakterie wewnątrzkomórkowe pasożyty, pierwotniaki. To jest tak specyficzny, że może wykryć nawet bardzo niskie stężenia przeciwciał.

Na jego użyciem preparatu krwinek czerwonych oczyszczonego owczego i czerwonych ciałek krwi ludzkiej wstępnie działaniu przeciwciał lub antygenów (to zależy od tego, co chce znaleźć laboratorium). W niektórych przypadkach, ludzkie krwinki czerwone leczonych immunoglobulinami. Odpowiedź serologiczna erytrocytów za ważne, jeżeli ich wytrącaniu się w dolnej części rury. Pozytywną reakcję można powiedzieć, gdy komórki są umieszczone w kształcie odwróconego parasola, zajmując całą dolną. Ujemna reakcja jest uzyskane, gdy czerwone krwinki osiąść w postaci słupa albo przyciski w środku dna.

Reakcja strącania (RP)

Reakcje serologiczne tego rodzaju służą do identyfikacji antygenów bardzo małych cząstek. Może to być, na przykład, białka (lub ich części), związki białek z lipidami, węglowodanami, część bakterii i ich toksyn.

Surowice do reakcji otrzymuje się przez sztucznego zakażenia zwierząt, zwykle królików. W tej metodzie, można uzyskać absolutnie żadnego serum strącanie. Inscenizacja serologicznego wytrącania podobny mechanizm działania na aglutynacji. Te przeciwciała w surowicy wiążą się do antygenu w roztworze koloidalnym w duże cząsteczki białek, które są osadzone na dolnej części rury lub na podłożu (żel). Metoda ta jest uważana za wysoce specyficzne i mogą wykryć nawet śladowe ilości substancji.

Stosowane do diagnozowania zarazy tularemia, wąglik, zapalenie opon mózgowych i innych chorób. uczestniczy również w obdukcji.

Test wytrącania żelu

Testy serologiczne można prowadzić nie tylko w ciekłym nośniku, ale w żelu agarozowym. Jest to tak zwany sposób współstrącania rozproszone. Z tym, badania kompozycji złożonych mieszanin antygenowych. Metoda ta opiera się na chemotaksję antygenów z przeciwciałami, i vice versa. Żel poruszają się względem siebie w różnych prędkościach i spotkanie w celu utworzenia linii strącania. Każda linia – jeden zestaw K-AT.

Neutralizacja egzotoksyna antytoksyny (RN)

Antytoksyczny surowicy może neutralizować egzotoksyny, które wytwarzają mikroorganizmy. Na podstawie tych danych oraz badań serologicznych. Mikrobiologia wykorzystuje tę metodę miareczkowania surowicy, toksyny i toksoidy, a także ich aktywności terapeutycznej. Siła neutralizacji toksyny określona w konwencjonalnych jednostkach – Ae.

Ponadto, dzięki tej reakcji można określić gatunków lub należących egzotoksynę. Jest on stosowany w diagnostyce tężcowi, błonicy, botulizm. Badania mogą być prowadzone na zewnątrz „na szkło” w żelu.

Reakcję lizy (RL)

Surowica odpornościowa, która dostaje się do organizmu pacjenta, jest, niezależnie od jego głównej funkcji biernej odporności, nawet i właściwości lityczne. Jest on zdolny do rozpuszczania środków mikrobiologicznych, składników komórkowych i zagraniczne wirusów do organizmu pacjenta. W zależności od specyfiki przeciwciał zawartych w surowicy izolowane bactericidin, cytolizyn, spirohetoliziny, hemolysins i innych.

Te specyficzne przeciwciała nazywane są „uzupełnieniem”. Okaże się w prawie wszystkich płynach ustrojowych, ma złożoną strukturę białkową i jest bardzo wrażliwa na wzrost temperatury, wstrząśnięty, kwasy i bezpośrednim promieniowaniem słonecznym. Ale w stanie suchym jest w stanie utrzymać swoje właściwości lityczne maksymalnie do sześciu miesięcy.

Istnieje kilka rodzajów badań serologicznych tego typu:

– bakterioliza;

– hemoliza.

Bakterioliza prowadzi się za pomocą surowicy krwi pacjenta i konkretnej surowicy odpornościowej z żywymi bakteriami. Jeśli więc badacz widzi lizy bakterii i reakcja zostanie uznana za wystarczającą liczbę dodatnią dopełniacza jest obecny we krwi.

Druga odpowiedź serologiczną krwi jest to, że zawiesinę erytrocytów zawierającą hemolysins oczyszczonej surowicy od pacjenta, które są aktywowane tylko w obecności konkretnej komplementu. Jeśli jest jedna, to laboratorium obserwując rozpuszczanie krwinek czerwonych. Reakcja ta jest szeroko stosowana w nowoczesnej medycynie w celu określenia miana dopełniacza (tj najmniejszą ilość wywołując lizę czerwonych krwinek) w surowicy krwi i produkcją próbie wiązania dopełniacza. To właśnie w taki sposób prowadzonej reakcji serologicznej kiły – Wasserman.

wiązanie dopełniacza (RSK)

Reakcję tę stosuje się do wykrywania przeciwciał w surowicy pacjentowi czynnika infekcyjnego, jak i zidentyfikuje inicjator jego antygenową strukturę.

Do tej pory opisaliśmy prostych testów serologicznych. RAC uznać trudną reakcję, ponieważ oddziałują nie dwa, ale trzy elementy: przeciwciało, antygen i uzupełniać. Jego istota polega na tym, że oddziaływanie pomiędzy przeciwciałem i antygenem, występuje tylko w obecności białek uzupełniać, które są adsorbowane na powierzchni utworzonego kompleksu K-AT.

Same antygeny po dodaniu dopełniacza, z zastrzeżeniem istotnych zmian, które wskazują na jakość reakcji. Może to być liza, hemoliza, unieruchomienie, bakteriobójcze lub bakteriostatyczne działanie.

Sama reakcja przebiega w dwóch etapach:

1. Powstawanie przeciwciało-antygen, która nie jest wizualnie zauważalny badacza.
2. Zmiana antygen pod działaniem dopełniacza. Faza ta zwykle można prześledzić gołym okiem. Jeśli odpowiedź wizualny nie jest widoczny, a następnie za pomocą dodatkowego systemu wskaźników, które pozwala na wykrycie zmian.

System wskaźników

Reakcja ta jest oparta na wiązanie dopełniacza. Probówki godzin po ustawieniu RSK dodano oczyszczony erytrocyty owcy i hemolitycznie osoczu niezawierającym dopełniacza. Jeśli rura pozostawiono niezwiązanego dopełniacza, który połączy się złożoną N-AT utworzoną pomiędzy komórkami krwi owczej i hemolizyny, powodując ich rozpuszczanie. Oznaczałoby to, że DGC jest ujemna. Jeśli czerwone krwinki zostały naruszone, a w związku z tym, że reakcja jest dodatnia.

hemaglutynacji (RHA)

Istnieją dwa zasadniczo różne hemaglutynacji. Jeden z nich – serologiczne, jest ona wykorzystywana do oznaczania grup krwi. W tym przypadku erytrocytów w interakcje z przeciwciałami.

I druga reakcja nie jest związane z testami serologicznymi, ponieważ czerwone krwinki reaguje z hemaglutyniną, wywoływanej przez wirusy. Ponieważ każdy wzbudzenia działa jedynie na konkretnych erytrocytów (kurczak, owce, małpy), możemy założyć, reakcja ta wąsko specyficzny.

Przejrzyste pozytywowe lub negatywowe reakcji, możliwe jest na miejscu komórek krwi w dolnej części rury. Jeśli postać przypomina odwrócony parasola, a następnie pożądany obecności wirusa we krwi pacjenta. A jeśli wszystkie czerwone krwinki uformowana jak kolumny monet, nie ma żadnych nieznanych patogenów.

Reakcja zahamowania hemaglutynacji (HAI)

Ten bardzo specyficzny reakcji, co pozwala na ustalenie formy, typu wirusa lub obecności swoistych przeciwciał w surowicy krwi pacjenta.

Jego istota polega na tym, że przeciwciała dodaje się do probówki zawierającej badany materiał, zapobiega odkładaniu antygenów na erytrocytach, zatrzymując w ten sposób hemaglutynacji. Jest to jakościowe określenie obecności specyficznych antygenów krwi do konkretnego pożądanego wirusa.

Reakcji immunofluorescencji (RIF)

Reakcję w zależności od zdolności do identyfikacji kompleksów z AT-AH mikroskopie fluorescencyjnym po barwników leczenie flyuorohromnymi. Metoda ta jest prosta w użyciu, nie wymaga izolacji czystej kultury i zajmuje niewiele czasu. Jest to niezbędne do szybkiej diagnozy chorób zakaźnych.

W praktyce te testy serologiczne są podzielone na dwie kategorie: bezpośrednie i pośrednie.

Bezpośredni RIF wytwarzane antygen, który uprzednio przetworzonego surowicy fluorescencyjny. I pośrednich, że lek jest najpierw traktowano konwencjonalnymi diagnosticum zawierającej przeciwciała wobec pożądanego antygenu, a następnie ponownie zastosować serwatkę fluorescencyjnego, który jest specyficzny dla białka kompleksu K-AT i komórki bakteryjne stają się widoczne w mikroskopie.